Titel: A Laboratory Guide to Biotin-Labeling in Biomolecule Analysis (Biomethods)
Verlag: Springer
Erscheinungsjahr: 2012
Sprache: Englisch
ISBN-10: 3034873514
ISBN-13: 9783034873512
Einband: Paperback
Zustand: Brand New
Gewicht: 0,45�Kilogramm

�ber diesen Titel

Inhaltsangabe

2.1 Introduction ........................................................... 32 2.2 Technical Procedures ................................................... 32 Chemical Synthesis ..................................................... 35 2.3 Results and Discussion. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . 38 . . . . . . . . . . . . . Chemical Synthesis ..................................................... 38 Binding to anti-CCK antisera and CCK-B receptors .......................... 40 Binding to streptavidin agarose and photoelution ........................... 40 Affinity chromatography ................................................. 41 2.4 Troubleshooting....................................................... 43 References . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . 44 . . . . . . . . . . . . . . . . . Purification of the Receptor for Pituitary Adenylate Cyclase-Activating Polypeptide (PACAP) using Biotinylated Ligands ......................... 45 Summary ............................................................. 45 3.1 Introduction . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . 46 . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.2 Technical Procedures ................................................... 48 Preparation of a Biotinylated Ligand ...................................... 48 Preparation of Membrane Fraction ........................................ 50 Solubilization of the PACAP Receptor ..................................... 51 Partial Purification of the PACAP Receptor ................................. 52 Affinity Purification of the PACAP Receptor ................................ 54 Final Purification of the PACAP Receptor .................................. 56 Receptor-Binding Assay ................................................. 57 3.3 Results and Discussion. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . 58 . . . . . . . . . . . . . 3.4 Troubleshooting ....................................................... 61 Impurity in PACAP27-Cys-NH............................................ 61 2 Low specific activity of the PACAP receptor despite a single band ............. 62 Acknowledgments ..................................................... 62 References . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . 63 . . . . . . . . . . . . . . . . . Photoreactive Biotinylated Peptide Ligands for Affinity Labeling ......... " 65 Summary ............................................................. 65 4.1 Introduction................................................ . . . . . . . .. . 66 . 4.2 Technical Procedures ................................................. " 67 Synthesis of a trifunctional photoactivatable biotinylating reagent ............. 67 Synthesis of photo reactive biotinylated peptide hormones ................... 67 Site-specific incorporation of biotin and photo labels in separate steps ........ 69 Photoaffinity labeling ................................................... 72 4.3 Results and Discussion .................................................. 76 Synthesis of photoactivatable insulins with permanent biotin labels ............ 76 Applications: Insulin .................................................... 78 VI Examples for other applications .......................................... 78 4.4 Troubleshooting....................................................... 79 References . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

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Exstowe, Exton, Exeter, EX3 0PP, United Kingdom

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Legal entity name: Edward Bowditch Ltd
Legal entity form: Limited company
Business correspondence address: Exstowe, Exton, Exeter, EX3 0PP
Company registration number: 04916632
VAT registration: GB834241546
Authorised representative: Mr. E. Bowditch

Widerrufsbelehrung

Wenn Sie Verbraucher sind, steht Ihnen ein Widerrufsrecht nach folgender Ma�gabe zu. Verbraucher ist jede nat�rliche Person, die ein Rechtsgesch�ft zu Zwecken abschlie�t, die �berwiegend weder ihrer gewerblichen noch ihrer selbst�ndigen beruflichen T�tigkeit zugerechnet werden k�nnen.

WIDERRUFSBELEHRUNG

Widerrufsrecht

Sie haben das Recht, binnen vierzehn Tagen ohne Angabe von Gr�nden diesen Vertrag zu widerrufen.

Die Widerrufsfrist betr�gt vierzehn Tage ab dem Tag, an dem Sie oder ein von Ihnen benannter Dritter, der nicht der Bef�rderer ist, die letzte Ware oder die letzte Teilsendung bzw. das letzte St�ck in Besitz genommen haben bzw. hat.

Um Ihr Widerrufsrecht auszu�ben, m�ssen Sie uns, Revaluation Books, Exstowe, Exton, EX3 0PP, Exeter, United Kingdom, 44 1179083586, mittels einer eindeutigen Erkl�rung (z.B. ein mit der Post versandter Brief, Telefax oder E-Mail) �ber Ihren Entschluss, diesen Vertrag zu widerrufen, informieren. Sie k�nnen daf�r das beigef�gte Muster-Widerrufsformular verwenden, das jedoch nicht vorgeschrieben ist. Sie k�nnen auch eine andere eindeutige Erkl�rung auf der Webseite "Meine Bestellungen" in Ihrem "Nutzerkonto" elektronisch ausf�llen und �bermitteln. Machen Sie von dieser M�glichkeit Gebrauch, so werden wir Ihnen unverz�glich (z. B. per E-Mail) eine Best�tigung �ber den Eingang eines solchen Widerrufs �bermitteln. Zur Wahrung der Widerrufsfrist reicht es aus, dass Sie die Mitteilung �ber die Aus�bung des Widerrufsrechts vor Ablauf der Widerrufsfrist absenden.

Folgen des Widerrufs

Wenn Sie diesen Vertrag widerrufen, haben wir Ihnen alle Zahlungen, die wir von Ihnen erhalten haben, einschlie�lich der Lieferkosten (mit Ausnahme der zus�tzlichen Kosten, die sich daraus ergeben, dass Sie eine andere Art der Lieferung als die von uns angebotene, g�nstigste Standardlieferung gew�hlt haben), unverz�glich und sp�testens binnen vierzehn Tagen ab dem Tag zur�ckzuzahlen, an dem die Mitteilung �ber Ihren Widerruf dieses Vertrags bei uns eingegangen ist. F�r diese R�ckzahlung verwenden wir dasselbe Zahlungsmittel, das Sie bei der urspr�nglichen Transaktion eingesetzt haben, es sei denn, mit Ihnen wurde ausdr�cklich etwas anderes vereinbart; in keinem Fall werden Ihnen wegen dieser R�ckzahlung Entgelte berechnet. Wir k�nnen die R�ckzahlung verweigern, bis wir die Waren wieder zur�ckerhalten haben oder bis Sie den Nachweis erbracht haben, dass Sie die Waren zur�ckgesandt haben, je nachdem, welches der fr�here Zeitpunkt ist. Sie haben die Waren unverz�glich und in jedem Fall sp�testens binnen vierzehn Tagen ab dem Tag, an dem Sie uns �ber den Widerruf dieses Vertrags unterrichten, an Revaluation Books, Edward Bowditch Ltd, Clifton Heights, Triangle West, BS8 1EJ, Bristol, United Kingdom, 44 1179083586, zur�ckzusenden oder zu �bergeben. Die Frist ist gewahrt, wenn Sie die Waren vor Ablauf der Frist von vierzehn Tagen absenden.

Sie tragen die unmittelbaren Kosten der R�cksendung der Waren. Sie m�ssen f�r einen etwaigen Wertverlust der Waren nur aufkommen, wenn dieser Wertverlust auf einen zur Pr�fung der Beschaffenheit, Eigenschaften und Funktionsweise der Waren nicht notwendigen Umgang mit ihnen zur�ckzuf�hren ist.

Ausnahmen vom Widerrufsrecht

Das Widerrufsrecht besteht nicht bzw. erlischt bei folgenden Vertr�gen:

Zur Lieferung von Zeitungen und Zeitschriften oder Illustrierten, mit Ausnahme von Abonnement Vertr�gen;
Bei der Lieferung digitaler Inhalte (ebooks), die nicht auf einem k�rperlichen Datentr�ger (z.B. einer CD oder DVD) geliefert werden, wenn Sie dem Beginn der Ausf�hrung vor der Bestellung ausdr�cklich zugestimmt und zur selben Zeit best�tigt haben, dass mit der Ausf�hrung begonnen werden kann und Sie Ihr Widerrufsrecht verlieren, sobald die Ausf�hrung begonnen hat.

ENDE DER WIDERRUFSBELEHRUNG

Muster-Widerrufsformular

(Wenn Sie den Vertrag widerrufen wollen, dann f�llen Sie bitte dieses Formular aus und senden Sie es zur�ck)

An: (Revaluation Books, Exstowe, Exton, EX3 0PP, Exeter, United Kingdom, 44 1179083586)

Hiermit widerrufe(n) ich/wir* den von mir/uns* abgeschlossenen Vertrag �ber den Kauf der folgenden Waren*/ die Erbringung der folgenden Dienstleistung*

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